Examinando por Materia "Flavonoides"
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Publicación Acceso abierto Differential activation of Fas (CD95) mediated apoptosis by apple procyanidins in human colon cancer cells SW480 and their derived metastatic cells SW620.(2011-11-04) Maldonado Celis, María Elena; Bousserouel, Souad; Gossé, Francine; Lobstein, Annelise; Raul, FrancisIntroduction: We investigated the effects of apple procyanidins (Pcy), oligomers of catechins and epicatechins on Fas receptor expression and function in human colon adenocarcinoma cells (SW480) and in their derived metastatic cells (SW620). Methods: Pcy were characterized by reverse-phase HPLC. Cell death, Fas proteins, DNA fragmentation, and mitochondrial membrane potential were analyzed by flow cytometry. Fas mRNA was analyzed by RT-PCR in real time. Results: Pcy up-regulated the expression of the Fas receptor at the cell surface of both cell lines but activated Fas gene transcription only in SW620 cells. In SW480 cells, Pcy combined with Fas agonist CH-11 enhanced Fas-mediated apoptosis involving the loss of mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation, which were abrogated by the antagonist antibody of Fas receptor, the anti-Fas ZB4. On the contrary, in SW620 cells, CH-11 was not able to enhance Pcy-triggered apoptosis indicating that Fas receptor-mediated apoptosis was not activated in these cells despite an up-regulation of Fas receptor gene expression. However, it was observed in SW620 cells that Pcy activated the Fas receptor-mediated apoptotic pathway after a specific blockage of TRAIL-death DR4/DR5 receptors. Conclusions: The present data showed that Pcy were able to activate the Fas receptor apoptotic pathway in SW480 cells and favored a cross-talk between TRAIL and Fas receptors in SW620 cells because specific blocking of TRAIL death receptors favored activation of the Fas receptor-mediated apoptosis. These important data may allow the emergence of new therapeutic protocols targeting death receptors against resistant metastatic cells. Introducción: Se estudiaron los efectos de procianidinas (Pcy) de manzana, oligómeros de catequinas y epicatequinas en la expresión y función del receptor Fas en células humanas de cáncer de colon (SW480) y sus derivadas metastásicas (SW620). Métodos: Las Pcy se caracterizaron por cromatografía líquida de alta presión (HPLC) en fase-reversa. Se analizaron por citometría de flujo la muerte celular, la proteína Fas, la fragmentación del ADN y el potencial de la membrana mitocondrial. Se analizaron los transcriptos de Fas por RT-PCR en tiempo real.Resultados: Las Pcy aumentaron la expresión del receptor Fas en la superficie celular de ambas líneas celulares pero la transcripción del gen Fas fue activado transcripcionalmente sólo en las células SW620. En las células SW480, las Pcy combinadas con el agonista de Fas CH-11 potenció la apoptosis mediada por Fas involucrando la pérdida del potencial mitocondrial de membrana y la fragmentación del ADN los cuales fueron evadidos por el anticuerpo antagonista del receptor Fas anti-ZB4. Por el contrario, en las células SW620, CH-11 no fue capaz de potenciar la apoptosis activada por Pcy indicando que la apoptosis mediada por el receptor Fas no fue activada en estas células a pesar del aumento en la expresión de Fas por regulación a nivel transcripcional. Sin embargo, se observó en las células SW620 que las Pcy activaron la vía apoptótica mediada por el receptor Fas después de un bloqueo específico de los receptores de muerte TRAIL DR4/DR5. Conclusiones: Estos datos muestran que las Pcy fueron capaces de activar la apoptosis a través del receptor Fas en las células SW480 y favorecieron una intercomunicación entre los receptores TRAIL y Fas en las células SW620 debido a que el bloqueo específico de los receptores de muerte TRAIL favoreció la activación de la apoptosis mediada por el receptor Fas. Estos datos podrían permitir el surgimiento de nuevos protocolos terapéuticos dirigidos contra receptores de muerte en células metastásicas resistentes.Publicación Acceso abierto Extracción y purificación de compuestos bioactivos presentes en el fruto de papaya mediante las tecnologías de extracción y adsorción.(Universidad del Valle, 2019-06-19) Rodríguez de Stouvenel, Aida; Vallejo Castillo, Vladimir; Grupo de Investigación Ingeniería de Procesos Agroalimentarios y Biotecnológicos (GIPAB)Los compuestos bioactivos están presentes en diferentes cantidades en los vegetales, los cuales son de importancia en la salud humana, por sus reconocidos efectos antioxidantes. La papaya (Carica papaya L), posee diversidad de estos compuestos, los cuales están distribuidos en las diferentes partes del fruto. Sin embargo, la obtención de esos compuestos a partir de las diferentes de la planta presenta varios desafíos, relacionados inicialmente con la extracción, la cual debe ser económica, rápida y con altos rendimientos, extractos que a continuación es necesario purificar y enriquecerlos o concentrarlos para que tengan una actividad antioxidante eficaz. Por lo que el objetivo general de esta investigación fue evaluar el desempeño de las tecnologías de extracción y purificación de polifenoles y flavonoides presentes en el epicarpio, pulpa y semilla del fruto de papaya. En la etapa de extracción se utilizó una tecnología de extracción asistida con ultrasonido, empleando agua como solvente y se realizó la adsorción con resinas poliméricas para purificar los compuestos bioactivos. En la extracción asistida con ultrasonido se evaluaron los factores relación sólido:solvente, temperatura, porcentaje de amplitud del ultrasonido, tipo de solvente y tamaño de partícula de las muestras, con el fin de maximizar la extracción de polifenoles, flavonoides y la actividad antioxidante del fruto de papaya. A continuación, con el extracto más promisorio, se realizó una adsorción por lotes, evaluando la capacidad de adsorción de polifenoles y flavonoides de cuatro resinas a diferentes temperaturas, así como también, el solvente empleado en la desorción por lotes. A partir de los datos de adsorción y desorción por lotes se encontró la resina con mayor afinidad a los compuestos fenólicos, con la cual se realizó la adsorción en columna de polifenoles y flavonoides. Con las columnas de adsorción de lecho fijo se evaluó la velocidad de flujo y tiempo total de adsorción. El estudio experimental incluyó el ecoproceso secuencial e integrado de las etapas de extracción con ultrasonido y la adsorción en las resinas. Los resultados de la extracción asistida con ultrasonido permitieron establecer que la parte de la fruta de papaya con mayor porcentaje de actividad antioxidante, polifenoles y flavonoides fue el epicarpio, valores que fueron mayores a los reportados en literatura. También fue evidente un efecto positivo con la aplicación de ultrasonido, permitiendo obtener porcentajes de rendimiento de extracción mayores al 70% tanto para polifenoles y flavonoides extraídos de epicarpio. La resina XAD4 y mezclas etanol-agua al 60% presentaron los mayores porcentajes de adsorción y desorción de polifenoles y flavonoides, respectivamente. La integración de la extracción y adsorción continua permitió enriquecer 4 veces más el extracto inicial en la cantidad de polifenoles y flavonoides. De esta manera se consiguió obtener fracciones con alto contenido de compuestos bioactivos mediante un proceso ecoamigable con bajo consumo de tiempo y energía.Publicación Acceso abierto Los flavonoides : apuntes generales y su aplicación en la industria de alimentos.(2011-10-13) Ochoa M., Claudia Isabel; Ayala A., Alfredo AdolfoLos flavonoides son compuestos fenólicos con una alta capacidad antioxidante que están presentes en la mayoría de las plantas, especialmente en las frutas y las hortalizas. Su actividad antioxidante ha atraído fuertemente la atención de las industrias de procesamiento de alimentos y de las compañías de pigmentos, cosméticas y farmacéuticas. En este artículo se presenta una revisión de literatura en cuanto a la estructura química, los procesos de extracción y cuantificación y las aplicaciones de los flavonoides.Publicación Acceso abierto Implementación de un método analítico rápido de extracción y análisis cuantitativo de flavonoides y fenoles totales en variedades de caña de azúcar(Universidad del Valle, 2009) Ordóñez Marín, Sonia Patricia; Larrahondo, Jesús E.; Plata, Cecilia deEn Colombia, con el objetivo de explorar y estudiar productos agroindustriales se efectuó un estudio de implementación de técnicas rápidas de extracción y cuantificación de flavonoides y fenoles en hojas, raíces y yemas de diferentes variedades de caña de azúcar, basadas en cromatografía líquida (HPLC) y espectrofotometría (UV/VIS). Igualmente, se evaluó el contenido de fenoles y flavonoides totales, como agentes antioxidantes de interés comercial en diferentes tipos de azúcares. Los resultados cromatográficos y espectrofotométricos indicaron que los contenidos de flavonoides difieren con la variedad, encontrándose un rango de flavonoides totales entre 0.080 y 1.40 mg/g de material vegetal. Entre los principales flavonoides detectados vía HPLC y de acuerdo con los estándares comerciales disponibles, se pueden mencionar la rutina, la quercetina, luteolina, naringina y apigenina. Los contenidos de fenoles y flavonoides totales en los azúcares orgánicos y crudos superaron a los presentes en el azúcar blanco comercial. Los flavonoides se encontraron en el rango de 27 y 100 mg/kg en los azúcares orgánicos, niveles que son comparables al de otras fuentes nutricionalesPublicación Acceso abierto Mechanisms of relaxation induced by flavonoid ayanin in isolated aorta rings from Wistar rats.(2011-11-22) Carrón, Rosalía; Sanz, Eva; Puebla, Pilar; Martín, María Luisa; San Román, Luis; Guerrero, Mario FranciscoIntroduction: This study shows the relaxant effect induced by ayanin in aorta rings from Wistar rats linked to nitric oxide/ cyclic-GMP pathway. This flavonoid is the prevalent compound obtained from Croton schiedeanus Schlecht (Euphorbiaceae), specie used in Colombian folk medicine for the treatment of arterial hypertension. Objectives: To identify possible action mechanisms of vascular relaxation induced by ayanin (quercetin 3,4',7-trimethyl ether). Methodology: Isolated aorta rings from Wistar rats obtained at the Animal House of the University of Salamanca were contracted with KCl (80 mM) or phenylephrine (PE, 10-6 M) and exposed to ayanin (10-6-10-4 M). Then, the effect of ayanin was assessed in deendothelized rings contracted with PE and in intact rings contracted with PE previously incubated with: ODQ (10-6 M), L-NAME (10-4 M), L-NAME plus D- and L-arginine (10-4 M), indomethacin (5x10-6 M), dipyridamole (3x10-7 M), glibenclamide (10-6 M), propranolol (10-6 M), verapamil (10-7 M) or atropine (3x10-5 M). In addition, the relaxant effect of acetylcholine (Ach, 10-8-3x10-4 M), and sodium nitroprusside (SNP, 10-9-3x10-5 M) was assessed in the presence and absence of ayanin (10-6 M). Results: Ayanin induced a greater concentration-dependent relaxation in vessels contracted with phenylephrine (pEC50: 5.84±0.05), an effect significantly reduced by deendothelization and by both ODQ and L-NAME. L-arginine was able to reverse the effect of L-NAME. Indomethacin weakly inhibited ayanin response. Dipyridamole, glibenclamide, propranolol, verapamil, and atropine did not affect ayanin relaxation. Ayanin did not have any effect on the relaxation elicited by acetylcholine (ACh), while weakly decreasing the relaxation induced by sodium nitroprusside (SNP). Conclusion: Ayanin induces endothelium-dependent relaxation in the rat aorta mainly related to nitric oxide/cGMP pathway, according to the response observed in the presence of L-NAME, L-arginine and ODQ. Introdución: Este estudio muestra el efecto vasodilatador inducido por ayanina en anillos de aorta de ratas Wistar vinculado con la vía óxido nítrico/GMP-cíclico. Este flavonoide es el compuesto mayoritario aislado de Croton schiedeanus Schlecht (Euphorbiaceae), especie utilizada en la medicina popular colombiana para el tratamiento de la hipertensión arterial. Objetivos: Identificar los posibles mecanismos vasodilatadores inducidos por la ayanina (quercetin 3,4',7-trimetileter). Metodología: Se adicionó ayanina (10-6 - 10-4 M) a anillos aislados de aorta procedentes de ratas Wistar contraídos con KCl (80 mM) o fenilefrina (10-6 M). Luego se evaluó el efecto de la ayanina en anillos sin endotelio contraídos con fenilefrina y en anillos íntegros, contraídos con fenilefrina, previamente incubados con: ODQ (10-6 M), L-NAME (10-4 M), L-NAME más L- o D-arginina (10-4 M), indometacina (5x10-6 M), dipiridamol (3x10-7 M), glibenclamida (10-6 M), propranolol (10-6 M), verapamilo (10-7 M) o atropina (3x10-5 M). Además se examinó la relajación inducida por acetilcolina (Ach, 10-8-3x10-4 M) y nitroprusiato de sodio (SNP, 10-9-3x10-5 M) en presencia y ausencia de ayanina (10-6 M). Resultados: La ayanina produjo una mayor relajación en los anillos contraídos con fenilefrina (pEC50: 5.84±0.05), efecto que se redujo en anillos sin endotelio o en anillos íntegros preincubados con ODQ y L-NAME. L-arginina fue capaz de revertir la respuesta inducida por L-NAME. La indometacina inhibió discretamente la relajación generada por la ayanina. El dipyridamol, la glibenclamida, el propranolol, el verapamilo y la atropina no modificaron el efecto de la ayanina. La ayanina no afectó la relajación inducida por la acetilcolina y débilmente disminuyó la inducida por el nitroprusiato de sodio. Conclusión: La ayanina induce una relajación dependiente del endotelio en la aorta de rata, efecto vinculado principalmente con la vía de óxido nítrico/GMP cíclico, de acuerdo con la respuesta observada en presencia de LNAME, ODQ y L-arginina.Publicación Acceso abierto Perfil vasodilatador del extracto y la fracción flavonoide acetilada obtenida de Calea prunifolia HBK.(2013-07-12) Onzaga, Ingrid L.; Rincón, Javier; Guerrero, Mario F.Introducción: Este estudio muestra el perfil vasodilatador en anillos aislados de aorta de ratas Wistar del extracto etanólico y de la fracción de flavonoides acetilada de Calea prunifolia HBK, especie utilizada popularmente en Colombia para el tratamiento de hipertensión arterial. Objetivos: Estudiar posibles mecanismos de acción inducidos por el extracto etanólico y la fracción flavonoide acetilada de C. prunifolia en anillos aislados de aorta de rata. Metodología: Luego de verificar el efecto hipotensor del extracto etanólico de C. prunifolia en ratas anestesiadas, se estudió la respuesta inducida por concentraciones crecientes (1 μg/ml–100 mg/ml) del extracto y la fracción flavonoide acetilada de C. prunifolia en anillos íntegros y en anillos sin endotelio expuestos a KCl (80 mM) o fenilefrina (1 μM). Adicionalmente, los anillos se preincubaron con una de las siguientes sustancias: L-NAME (0.1 mM, inhibidor de NOsintetasa), azul de metileno (1 μM, inhibidor de guanilil-ciclasa), glibenclamida (1 μM, inhibidor de canales K+ ATP), atropina (30 μM, antagonista muscarínico), propranolol (1 μM, bloqueador de receptor β), o indometacina (1 μM, inhibidor de ciclooxigenasa), así como la respuesta inducida por CaCl2 en solución de Krebs sin Ca2+ en presencia del extracto o de la fracción. Resultados: El extracto de C. prunifolia disminuyó en función de la dosis (5-75 mg/kg, iv.) la presión arterial sin afectar la frecuencia cardíaca en ratas Wistar anestesiadas. Tanto el extracto como la fracción flavonoide relajaron anillos de aorta precontraídos con KCl (80 mM) y fenilefrina (1 μM) con valores de CI50 de 35 y 67 μg/ml, y 34 y 66 μg/ml, respectivamente. Los mayores efectos, tanto del extracto como de la fracción, se observaron en anillos contraídos con CaCl2. Discusión: Los resultados sugieren que los compuestos flavonoides acetilados juegan un papel clave en el efecto vasodilatador inducido por el extracto etanólico de C. prunifolia, en apariencia por mecanismos especialmente vinculados con antagonismo de canales de calcio. Introduction: This study shows the vasorelaxant profile in isolated aortic rings from Wistar rats of the ethanolic extract and the acetylated flavonoid fraction obtained from Calea prunifolia, specie used in Colombian folk medicine for the treatment of arterial hypertension. Objectives: To study possible action mechanisms implicated in the response induced by the ethanolic extract and the acetylated flavonoid fraction obtained from C. prunifolia in isolated aortic rings. Methodology: After verifying the hypotensive effect of the etanolic extract in anaesthetized rats, the response induced by the extract and the acetylated flavonoid fraction (1 μg/ml-100 mg/ml) in isolated aortic rings from Wistar rats contracted with KCl (80 mM) or phenylephrine (1 μM) was studied. Then, the effect of the extract and the fraction was assessed in deendothelized rings contracted with KCl or in intact rings contracted with KCl (80 mM) and preincubated with one of the following substances: L-NAME (0.1 mM, NO-sintasa inhibitor), methylene blue (1 μM, guanyl ciclasa inhibitor), glibenclamide (1 μM, K+ ATP channel inhibitor), atropine (30 μM, muscarinic antagonist), propranolol (1 μM, β receptor blocker), or indomethacin (1 μM, COX inhibitor). The response induced in rings contracted with CaCl2 in Krebs solution without Ca2+ also was analised. Results: The ethanolic extract elicited a dose-response (5-75 mg/kg. iv.) decrease in the blood pressure levels without affecting heart rate in anaesthetized rats. Both, extract and fraction relaxed KCl (80 mM) and phenylephrine (1 μM) precontracted isolated aorta rings with IC50 of 35 and 67 μg/ml against KCl and 34 and 66 μg/ml against phenylephrine, respectively. Rings exposed to CaCl2 in Krebs’ solution without Ca2+ showed the better response induced by both extract and fraction. Discussion:These results suggest that acetylated flavonoid compounds play a key role in the vasorelaxant effect induced by C. prunifolia by mechanisms mainly related to calcium channels antagonism.