Examinando por Materia "Reacción en cadena de la Polimerasa"

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    PublicaciónAcceso abierto
    Concentración y pureza del ADN de muestras sanguíneas en papel Whatman fta almacenadas entre 1 a 3 años.
    (2015-10-02) Osorio, Julio; Pachajoa Londoño, Harry Mauricio; Hurtado, Paula
    Introducción: El papel Whatman FTA es una alternativa para transportar y almacenar diferentes tipos de muestras y optimizar el tiempo, espacio de almacenamiento y costos. Desde hace varios años se utiliza este método de forma rutinaria y muchos centros médicos almacenan muestras por periodos de tiempo prolongados. Objetivo: Determinar el efecto del tiempo de almacenamiento de muestras de sangre en papel Whatman sobre la concentración del ADN. Materiales y métodos: Se utilizaron 110 muestras de sangre periférica que fueron guardadas en papel filtro durante un periodo de tiempo de uno a tres años. Estas muestras fueron guardadas como parte de programa ECLAMC. La extracción del ADN se realizó por medio de resinas de intercambio iónico (Chelex-100®). Se verificó la amplificación por medio de PCR. Se utilizó el gen GAPDH. Por medio de espectrofotometría utilizando el NanoDrop, se cuantificó cada una de las muestras evaluadas. Resultados: El tiempo de almacenamiento fue diferencial con un rango de 520 a 1135 días. La concentración de ADN presentó variabilidad desde 0.81ng/uL a 5.54ng/ uL. La relación 260/280 osciló desde -5.22 hasta 14.17nm. La relación 260/230 se presentó en un rango de 0.27 a 1.39nm. Conclusión: La disminución en la concentración en la muestra de ADN (ug/uL) representa un cambio negativo en el valor esperado en el tiempo de almacenamiento. SUMMARY Introduction: Whatman FTA is an alternative to transport and store different types of samples and optimizes the time, storage space and costs. For many years this method was used routinely and many medical samples were stored for long periods of time. Objective: To determine the effect of storage time of blood samples on Whatman paper on the DNA concentration. Materials and methods: One hundred and ten peripheral blood samples on filter paper were kept for a period of one to three years. These samples were kept as part of ECLAMC program. DNA extraction was performed by means of ion exchange resins (Chelex-100®). And verified by PCR amplification of GAPDH gene. NanoDrop quantified DNA on each samples. Results: The storage time was differential with a range of 520-1135 days. DNA concentration varies from0.81ng/uL to 5.54ng/ uL. The 260/280 ratio ranged from -5.22 to 14.17nm. The ratio 260/230 is provided in a range from 0.27 to 1.39nm. Conclusion: A decrease in concentration in the sample of DNA (ug / uL) represents a negative change in the expected value in the storage time.