Resumen en español

La biopsia selectiva del ganglio centinela es el procedimiento de elección para la estadificación axilar del cáncer de mama y permite seleccionar un subgrupo de pacientes en las que la linfadenectomía no aporta ningún beneficio adicional. Se recomienda estudiar el ganglio centinela en su totalidad a fin de evitar sesgos de localización de las metástasis, por lo que la inclusión de técnicas moleculares para estudio, permite cumplir con esta meta. El objetivo de esta investigación fue desarrollar la metodología y técnica molecular requerida para el estudio de biopsias de ganglios centinela en cáncer de mama temprano (hasta 3 cm), empleando la expresión diferencial de los genes Mamaglobina y Citoqueratina 19 (CK19), mediante la RT-PCR (PCR transcriptasa reversa y qPCR (PCR en tiempo real). Durante el periodo de Octubre 2004 a Marzo 2010 se incluyeron en el estudio 301 pacientes del Hospital Clínico San Carlos de Madrid España (HCSC) en estadio I y II de cáncer de mama. A todas se les realizó la técnica quirúrgica del ganglio centinela, identificación de metástasis ganglionar por las técnicas histológicas convencionales, tales como: congelación, impronta, coloración de hematoxilina y eosina (H&E) e Inmunohistoquímica (IHQ). Se recolectaron muestras congeladas a -80°C para la extracción de RNA y el estudio molecular por RT-PCR y qPCR para los genes Mamaglobina y CK19. Los análisis estadísticos se realizaron empleando el software STATA 12.0. La asociación entre Mamaglobina y CK19 se determinó por la prueba exacta de Fisher. La validez diagnóstica: sensibilidad (S), especificidad (E), valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) se determinaron con un nivel de confianza del 95%, donde la pruebas Gold estándar fueron H&E y la combinación H&E+IHQ. El análisis de supervivencia para la expresión de Mamaglobina y CK19 (RT-PCR y qPCR), H&E y la combinación H&E+IHQ se estimo por la prueba de Kaplan-Meier y las diferencias entre estas por el test de Log-Rank.