Escuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico
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Publicación Acceso abierto Utilización de Galleria mellonella como modelo para el estudio de la patogénesis de aislados humanos de Streptococcus agalactiae (SGB).(Universidad del Valle, 2020-05-13) Crespo Ortíz, Maria del Pilar; Barreto Parra, Mauricio Rafael; Uribe, Farid; Grupo de investigación: Microbiología y Enfermedades infecciosas / Biotecnología e infecciones bacterianasEl Streptococcus agalactiae o Streptococcus del grupo B (SGB) es un colonizante habitual del tracto gastrointestinal y urogenital humano. Sin embargo; cuando el SGB invade causa infecciones severas en neonatos, mujeres embarazadas y adultos susceptibles. No obstante, los mecanismos por los que se potencia su paso de comensal a invasor aún son desconocidos. Dado que condiciones del microambiente puede afectar la expresión de los factores de virulencia, este estudio tuvo por objetivo establecer un modelo invertebrado (Galleria mellonella) para el estudio de la virulencia e interacciones in vivo de aislados invasivos y no invasivos de SGB. Se determinó la viabilidad de las larvas de Galleria mellonella inoculadas con las cepas de referencia de SGB. Los efectos de temperatura, pH y competencia bacteriana en la viabilidad de las larvas fueron analizados al igual que la respuesta de los hemocitos a la infección. Las larvas se inocularon con aislados obtenidos de infecciones invasivas y con aislados colonizantes. SGB se multiplicó e infectó el modelo en forma dosis dependiente (Dosis letal 50%: 1x107 UFC/larva a las 24 h). La infección causó melanización con vacuolización y depleción de hemocitos. La letalidad en Galleria incremento con la temperatura (37°C) y el pH (> 5.5 – 7.2). Los ensayos de competencia bacteriana mostraron un fuerte efecto antagonico de Lactobacillus Gasseri (tanto células como filtrados libres de células) sobre la infección por SGB y mejoró de manera significativa la sobrevida de Galleria. El efecto protector de L. Gasseri fue evidente aún en condiciones similares a las de la colonización por SGB indicando que el efecto modulador de L. Gasseri puede ser ejercido por sus productos metabólicos. La incubación de SGB con los filtrados ácidos de L. Gasseri causaron inhibición del crecimiento de SGB y disminuyó la mortalidad de las larvas incluso después de la infección con el clon hipervirulento de SGB (ST 17), un aislado clínico multirresistente. El efecto protector de L. Gasseri parece ser mediado principalmente por el pH acido sin embargo experimentalmente se observó que otros mecanismos pueden estar implicados y son inóculos dependientes. En este estudio también se pudo observar que la infección de G. mellonella con aislados de SGB considerados invasivos causa una mortalidad en las larvas mayor al 45% después de 24 horas, mientras que aislados considerados no invasivos o colonizantes mostraron en su mayoría menor mortalidad. Un aislado previamente identificado como el clon hipervirulento (ST17) mostró una letalidad reproducible y significativamente mayor que los demás (100% 24-48h).Publicación Acceso abierto "Construcción de un modelo sistémico del proceso de integración lentiviral".(2018-08-23) García Vallejo, Jesús Felipe; Sánchez, Adalberto; Domínguez, Martha Cecilia; Salcedo Cifuentes, Mercedes; Montoya, Julio CésarLa integración de los lentivirus en el genoma humano es uno de los procesos más complejos en el estudio de la dinámica estructural y funcional del virus durante la progresión de la enfermedad. Uno de los principales problemas en el estudio de la integración es la existencia de muchos sitios calientes (“hotspot”), de preferencia viral y la razón por la que el virus prefiere estas zonas es aún desconocida. La evidencia actual muestra que la integración de cADN lentivirus no es al azar, ya que algunas condiciones topológicas de la cromatina interfásica son importantes para determinar el "nicho" genómico para integrarse.Publicación Acceso abierto "Dinámica y significado de la integración simultánea de provirus del VIH-1 y del HTLV-I en linfocitos de sujetos doblemente infectados..".(2018-08-23) García Vallejo, Jesús Felipe; Domínguez, Martha C.; Salcedo Cifuentes, Mercedes; Flórez, Ofelia; Díaz, Diane; Soto, Juliana; Peña, Ángela VivianaEn este trabajo, por primera vez, a partir tanto de los datos de monointegración como de la simulación bioinformática de la cointegración VIH-1/HTLV-1 combinada y analizada en forma integral, se demostró la hipótesis de que una combinación específica de características de la cromatina para cada tipo de infección, facilitaría el proceso de integración simultánea de provirus VIH-1 y HTLV-I. En este contexto, caracterizamos el ambiente genómico para la integración de ambos retrovirus, como aquellas regiones del genoma hospedero donde la acción de diversas características de la cromatina interfásica asociada, remodelan de tal forma su estructura, que favorecerían la integración de los cADN virales, dependiente del tipo de retrovirus y de la interacción de ambos en procesos de cointegración. Los análisis de este estudio utilizaron modelos multivariados permitieron describir, en forma independiente en cada proceso integracional, el ambiente genómico y cromosómico preferido para su integración en el genoma humano. Un ambiente cromosómico en donde se obtuvieron los clúster de cromosomas con mayor número de integraciones y similares en la distribución de las características genómicas incluidas en el estudio y, un ambiente genómico en donde la colinealidad entre las variables juega un papel importante en la selección de aquellas regiones cromatínicas blanco de integración.